内容搞要: 一、香菇原生质体融合技术研究在香菇原生质体制备,进行了脱壁酶浓度及其组成、菌丝生理状况、渗透压稳定剂、酶解温度、PH、酶解时间、菌丝培养基成发等七种因子的比较试验,建立了制备香菇菌丝原生质体的优选条件,原生质体产量达10^7个/ml以上纯化后的原生质体在以蔗糖为渗透压稳定剂和添加10%菌丝提取液的再生培养基上再生率大20%建立了以 PEG(30%Wt6000)促融剂的化学融合方法融合率达10^4―10^5根据四极性异综合结合高等担子菌的遗传特性和单双核原生质体具有的不同特点建立了在香菇种内和种间的原生质体融合中,以单核体为亲本融合形成双核后以自然性状标记为主以同功酶拮抗反应酶活性和出菇试验为辅的融合子鉴定方法,在香菇种内原生质体融合中以单核原生质本为亲本筛选出形成双核体的融合子经测定这些融合子与亲本形在明显的拮抗瓜的生化性状差异,并在木屑代料培养基上发育成子实体。在香菇种间原生质体融合中以香菇( 阔叶树为生长基质)和虎皮香菇(以针叶树为基质)为亲本构建了32个种间融合子这些融合子与亲本相比形成了新的特性:融合子双核体菌丝无锁状联合但能形成了实体对种间融合子进行的生理生化及遗传性状的测定结果表明,在融合子中大部分出邮以虎皮香菇遗传性状为主的融合子类型但也有部分中间型在一些指标中还出现超过双亲的性状。二、原生质体融合技术在香菇育种上的应用选择了不同生态型和基因型的香菇栽培种和野生种菌株为亲本进行了8个组合的香菇种内原生质体组合,建子27个香姑种内融合子经过两年小区栽培试验和上海市香菇菌种考评试验,筛选出两个具有优良栽培性状的融合子,它们分别比我国香菇主要栽培种7402增产24%和15%现已在上海和全国各省进行中试。三、异综结合食用菌的原生质体单核化研究:根据食用菌菌丝体在帛备原生质体时形成无核、单核和双核三种类型原生质体的现象,系统地研究了异综结合食用菌的原生质体单核化现象和遗传规律通过技术上改进,准确稳定地从不同异综结合食用菌的双核菌丝体中得到大量的单核原生质体并测出了单核原生质体的交配型,菌丝生长速度纤维素酶活性等性状通过研究得出⑴原生质体单核化是异综结合食用菌在原生质体制备和再生中的一个普遍现象⑵单核原生质体是没有经过减数分裂不同于孢子单核体的无性后代是研究食用菌遗传性状的重要材料这两个结论。根据这一研究结果提出单核原生质体在食用菌育种上应用的理论。由于单核原生质体是具有特殊遗传背景的无性单核体,利用这一材料做为杂交育种的亲本可以克服常规育种中很多的局限性具有广阔的应用前景。在建立香菇原生质体制备、再生和融合的优选条件基础上,构建了具有新遗传特性的127个香菇种内融合子和32个香菇与虎皮香菇的种间融合子。经过两年的多点栽培评比,结合遗传变异分析和杂种优势的生理生化指标测定,筛选出二个具有优良栽培性状的香菇种内融合子香融1(农1)和香融 2(农2),这两个细胞工程菌株比我国香菇主栽培菌种7402分别增产24%和 15%,产量差异达显著水平,并具有菇形好,菌肉厚等特点。大面积生产表明:“沪农1号”每100kg段木产干菇2kg,比当地主栽品种增产42.9%,花菇与厚菇率高出25~50%,符合出口标准的达80%以上,接种成活率为98%,在浙江和江西等省山区推广应用面积为2770万kg段木推广程度16.8%,已统计到的社会效益分别比对照菌株和国内代料主栽品种增产 38%和56%,该菌种适应性广,抗逆性强,大面积推广5年持续高产稳产,菇形圆整,肉厚柄短,推广面积8380.5万段,已统计到的社会效益达12500万元,88年创汇88万美元,以上两菌与国内同类菌种相比,具有优质高产的明显特点。联系地址:上海市农业科学院食用菌所邮政编码:201106 电话:62418660-92 联系人:黄渭苹。获奖情况:一九九○年度上海市农科院科技成果一等奖一九九一年获农业部科技进步二等奖。
原生质体融合技术及其在香菇育种上的应用
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